زمینه و هدف: پلاسمای سرد یک فناوری نوظهور جهت ضدعفونی غیرحرارتی، بدون مواد شیمیایی و سازگار با محیط زیست است. آب فعال شده با پلاسما در سال های اخیر مورد توجه بسیاری از محققان گرفته است. علی رغم مطالعات گسترده و بررسی اثرات ضدباکتریایی آب فعال شده با پلاسما، اثرات ضد یوکاریوتی آن مشخص نگردیده است. آمیب آکانتومبا عامل ایجادکننده انسفالیت گرانولوماتوز، زخم های پوستی و کراتیت آکانتاموبایی در انسان است. با توجه به اهمیت بهداشتی آکانتاموبا، در این مطالعه اثر ضدآمیبی آب فعال شده با پلاسما بر تروفوزوییت و کیست های آکانتاموبا کستلانی بررسی گردید. روش کار: جهت انجام این مطالعه از آب فعال شده با روش پلاسمای سرد در فشار اتمسفر استفاده گردید. ویژگی های فیزیکوشیمیایی آب تولید شده با اندازه گیری pH، میزان پراکسید هیدروژن، یون نیتریت و نیترات ارزیابی گردید. برای ارزیابی اثر آب فعال شده با پلاسما بر آکانتاموبا کستلانی، تروفوزوییت و کیست های آکانتاموبا به مدت 0/5، 1، 2، 3، 4 و 5 ساعت با آب فعال شده با پلاسما مواجه گردیدند. برای هر زمان سه تکرار مورد بررسی قرار گرفت. در زمان های مذکور میزان زنده مانی سلول ها با رنگ آمیزی تریپان بلو و شمارش روی لام هموسیتومتر محاسبه گردید و نتایج مورد بررسی آماری قرار گرفت. یافته ها: بر اساس نتایج فیزیکوشیمیایی، میانگین pH آب فعال شده با پلاسما در این مطالعه در حدود 3/4، میزان پراکسید هیدروژن 102 میکرومولار، میزان نیترات 737 میکرومولار و میزان نیتریت 36/94 میکرومولار حاصل شد. نتایج مطالعه حاضر نشان داد که آب فعال شده با پلاسما تروفوزوییت های آکانتاموبا کستلانی را پس از سه ساعت مواجهه و کیست های آکانتاموبا کستلانی را پس از 4 ساعت مواجهه از بین برد. از طرف دیگر تعدادی از تروفوزوییت ها پس از مواجهه با آب فعال شده با پلاسما به تدریج تبدیل به کیست شدند. این کیست ها مقاومت بیشتری را در مقابل آب فعال شده با پلاسما از خود نشان دادند و پس از پنج ساعت مواجهه از بین رفتند. نتیجه گیری: در این مطالعه برای اولین بار اثر آب فعال شده با پلاسما بر آکانتاموبا کستلانی مورد بررسی قرار گرفت. نتایج مطالعه حاضر نشان داد که آب فعال شده با پلاسما قادر به از بین بردن تروفوزوییت ها و کیست های آکانتاموبا کستلانی می باشد. بنابراین از این نوع آب می توان جهت ضدعفونی کردن و از بین بردن آکانتاموبا کستلانی استفاده کرد.

مقدوه: از کلر به عنوان یک گندزدای موثر در از بین بردن میکروارگانیسم های بیماری زا در سیستم تصفیه آب شهری استفاده می شود. با این حال مطالعات نشان داده اند که Acanthamoeba از منابع آبی مختلف کشورمان علی رغم تصفیه جدا می شود. در این مطالعه به بررسی اثر غلظت های متداول کلر که در سیستم تصفیه آب شهری استفاده می شود بر زنده مانی Acanthamoeba castellanii و تغییرات فراساختاری ناشی از آن پرداخته شده است. روش ها: تروفوزوئیت ها و کیست هایAcanthamoeba در زمان های مختلف (30 دقیقه، 1 و 2 ساعت) با غلظت های مختلف (ppm10-1) هیپوکلریت کلسیم، مواجه شدند. برای بررسی تغییرات فراساختاری تروفوزوئیت آمیب از میکروسکوپ الکترونی نگاره و گذاره استفاده شد. نتایج و بحث: نتایج این مطالعه نشان داد که غلظت های متداول کلر قادر به از بین بردن کامل تروفوزوئیت ها و کیست های A. castellanii نمی باشند. همچنین کیست ها به غلظت های مختلف کلر مقاوم تر بوده و در زمان و غلظت برابر کلر، درصد کمتری از کیست ها در مواجه با کلر از بین می روند. تغییر نفوذپذیری غشای سلولی، کاهش تعداد پاهای کاذب، افزایش میتوکندری، واکوئله شدن سیتوپلاسم و تغییر در شبکه ی اندوپلاسمی از تغییرات فراساختاری ایجاد شده در آمیب بود. این مطالعه ضرورت بازنگری دستورالعمل بکارگیری گندزداهایی نظیر کلر را در تصفیه ی سیستم آب شهری مطرح می-کند. چرا که علاوه بر بیماری زا بودن آمیب، مخزن بودن آن و انتقال عوامل میکروبی حائز اهمیت است.

سابقه و هدف: گونه های آکانتاموبا، ارگانیسم های آمفی زوئیکی هستند که در همه جا یافت می شوند و می توانند بیماری های کشنده ای مانند کراتیت و آنسفالیت را در انسان و حیوانات اهلی ایجاد کنند. اولین گام در مطالعات مرتبط با آکانتاموبا، دستیابی به مقدار زیاد آمیب در محیط کشت است. هدف اصلی مطالعه حاضر ارزیابی محیط TYM به عنوان یک محیط غنی برای تشخیص کراتیت های آکانتاموبایی در خراش قرنیه بوده است. مواد و روش ها: یک گونه آکانتاموبا که قبلاً ژنوتیپ شده بود، در این مطالعه تجربی مورد استفاده قرار گرفت. آکانتاموبا در پنج پلیت کشت آگار غیرمغذی 5/1 درصد (NNA) ((Non-nutrient agar همراه باکتری اشرشیاکلی (E. coli) و بدون اضافه کردن TYM و پنج پلیت آگار غیرمغذی 5/1 درصد به همراه باکتریE. coli با محیط TYM کشت داده شد. رشد آمیب با میکروسکوپ معکوس بعد از 24 و 48 ساعت بررسی گردید. یافته ها: نتایج نشان داد که افزودن محیط TYM، رشد تروفوزوئیت ها را 8/8 برابر افزایش می دهد و آمیب ها را می توان بعد از 24 تا 48 ساعت از محیط جدا کرد. استنتاج: با توجه به رشد قابل توجه آکانتاموبا در محیط کشت NNA بهینه شده، استفاده از این محیط برای انبوه سازی و شناسایی به موقع آکانتاموبا در نمونه های بالینی و محیطی توصیه می شود.

لطفا برای مشاهده چکیده به متن کامل (PDF) مراجعه فرمایید.

مقدمه: آکانتاموبا تک یاخته ای بیماری زا و فرصت طلب است که می تواند باعث عوارضی همانند ابتلا به کراتیت چشمی آمیبی، آنسفالیت گرانولوماتوز آمیبی و بیماری های پوستی شود. علاوه بر این می تواند در افرادی که نقص دستگاه ایمنی بدن دارند، سبب عفونت شدید گردد. با توجه به اینکه بیماری های سرکوب کنندۀ دستگاه ایمنی روزبه روز در حال افزایش هستند، توجه به این نوع انگل ضروری است. هدف از این مطالعه بررسی وجود آکانتاموبا و تعیین ژنوتایپ آن در منابع مختلف آب شهرستان ایلام بود. مواد و روش­ها: در این مطالعه، 50 نمونۀ آب از مناطق مختلف ایلام شامل رودخانه ها، میدان ها شهری، استخرهای شنا، چشمه ها، آب های راکد شهری و پارک ها جمع آوری شد. نمونه ها با کمک فیلتر نیتروسلوزی (45/0 میکرون) فیلتر گردیدند و سپس فیلتر در محیط کشت آگار غیرمغذی غنی شده با باکتری اشرشیا کلای کشت شده قرار گرفت و نمونه های مثبت به روش PCR و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی برای تکثیر قطعۀ bp 18s rRNA 500  انجام شد. درنهایت، توالی نمونه ها بررسی و درخت فیلوژنیک ژنوتایپ ها ترسیم گردید. یافته ­های پژوهش: از مجموع 50 نمونۀ آب، 19 مورد (38 درصد) به روش میکروسکوپی از نظر آکانتاموبا مثبت تشخیص داده شدند و به کمک روش PCR نیز 16 نمونه (32 درصد) مثبت و تأیید گردیدند. بررسی ژنوتایپ این نمونه ها نشان داد که نمونه ها متعلق به ژنوتایپ های T4 (5/62 درصد)، T2 (5/12 درصد) و T11 (5/12 درصد) بودند. بحث و نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که منابع آبی ایلام به این انگل آلوده هستند و ژنوتایپ غالب آکانتاموبا T4 است که از سویه های بیماری زا است. با توجه به عوارض خطرناک ناشی از این آمیب، آموزش بهداشت برای افزایش آگاهی دربارۀ انتقال و نیز اقدامات بهداشتی برای پیشگیری از آلودگی توصیه می شود.

زمینه و هدف: آکانتاموبا پاتوژن فرصت طلبی است که ممکن است باعث ایجاد آنسفالیت گرانولوماتوز کشنده و کراتیت چشمی در انسان ها و حیوانات شود. افزایش روزافزون استفاده کنندگان از لنزهای تماسی باعث فراوانی کراتیت آمیبی می شود که به دلیل فقدان داروهای موثر، درمان این بیماری دشوار است. هدف از این مطالعه بررسی عصاره اتانولی گیاه چایروفیلوم ماکروپودیوم روی ژنوتیپ T4 آکانتاموبا بود. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، نمونه گرفته شده از بیمار روی محیط آگار غیر مغذی کشت داده شد. غلظت های مختلف (1/25، 2/5، 5 و 10 میلی گرم بر میلی لیتر) از عصاره اتانولی بر تروفوزوییت ها و کیست های آکانتاموبا در سه زمان (24، 48 و 72 ساعت) در شرایط برون تنی اثر داده شدند. تعداد انگل های زنده و مرده با رنگ آمیزی تریپان بلو و لام نیوبار محاسبه شدند. همچنین درصد آپوپتوز کیست ها با استفاده از فلوسایتومتری بررسی گردید. یافته ها: در حضور 10 میلی گرم بر میلی لیتر عصاره اتانولی در محیط کشت درصد تروفوزوییت های زنده بعد از 24، 48 و 72 ساعت به ترتیب به 53/6، 15/11 و صفر درصد رسید. در حالی که در مورد کیست ها بعد از 24، 48 و 72 ساعت به ترتیب 65/31، 43/31 و صفر درصد کیست ها زنده بودند. نتایج فلوسایتومتری نشان داد که در نمونه تحت درمان با عصاره پس از 72 ساعت میزان آپوپتوز 0/09 درصد بود. نتیجه گیری: عصاره اتانولی گیاه چایروفیلوم ماکروپودیوم با توجه به سمیت بالایی که برای کیست ها دارد، می تواند کاندید امیدوارکننده ای برای پیشرفت داروهای ضد آکانتاموبا باشد. از آنجایی که در این مطالعه از عصاره خام گیاه چایروفیلوم ماکروپودیوم استفاده شد، تحقیقات بیشتر جهت به دست آوردن مواد موثره گیاه و مکانیسم عمل آن ضروری است. همچنین، می توان آن را در شرایط درون تنی و یا حتی بر علیه سایر انگل ها آزمایش کرد.

زمینه و هدف: بسیاری از عصاره های گیاهی، خواص ضدانگلی دارند و حتی بعضی برای درمان در in vivo موثرند. یکی از گیاهان دارویی، اسپند (Peganum harmala) است که می تواند از 100-30 سانتی متر رشد کند. هدف مطالعه حاضر تعیین اثر عصاره آبی اسپند بر تروفوزوئیت ها و کیست های آکانتاموبا در شرایط برون تنی بود. روش بررسی: در این مطالعه تجربی، یک نمونه از بیمار با کراتیت آمیبی در محیط کشت آگار غیرمغذی 5/1% (Non Nutrient Agar، NNA) همراه با باکتری اشرشیاکلی کشت داده شد. سپس عصاره آبی اسپند تهیه گردید. عصاره در سه زمان (24، 48 و 72 ساعت) در غلظت های مختلف (25/1، 5/2، 5 و 10 میلی گرم برمیلی لیتر) روی تروفوزوئیت ها و کیست های آکانتاموبا اثر داده شد. درصد انگل های زنده با استفاده از لام هموسیتومتر، آزمون MTT 3-(4، 5-dimethylthiazol-2-yl)-2، 5-diphenyltetrazolium bromide])[ و فلوسایتومتری ارزیابی گردید. داده ها با استفاده از آزمون های واریانس یک طرفه، آزمون کولموگروف-اسمیرنوف یک نمونه ای و اندازه گیری های تکراری تجزیه و تحلیل شدند. سطح معنی داری، 05/0 در نظر گرفته شد. یافته ها: عصاره، فعالیت ضدآمیبی وابسته به دوز و زمان روی تروفوزوئیت ها و کیست ها را نشان داد. در حضور 10 میلی گرم برمیلی لیتر عصاره در محیط کشت پس از 72 ساعت، 47/32% از تروفوزوئیت ها و 15/50% ازکیست ها زنده بودند. نتیجه گیری: نتایج این پژوهش نشان داد عصاره آبی اسپند، فعالیت ضدآکانتاموبایی دارد؛ بنابراین مطالعه روی حیوانات آزمایشگاهی جهت تاثیر عصاره پیشنهاد می گردد.

1سابقه و هدف: لوفومونیازیس یک بیماری انگلی نوظهور نسبتاٌ شایع است که عامل ایجادکننده آن تک یاخته پاتوژنی به نام لوفوموناس است که بیشتر دستگاه تنفس تحتانی انسان (ریه و برونش ها) را درگیر می کند. انگل لوفونوناس در دستگاه گوارش حشراتی از قبیل سوسک ها و مایت ها به صورت همزیستی زندگی می کنند. آکانتاموبا یک آمیب با زندگی آزاد است که در چرخه زندگی آن دو شکل تروفوزوئیت و کیست وجود دارد. دستگاه تنفسی و راه های هوایی به عنوان گذرگاه و محل اسقرار طیف وسیعی از میکروارگانیسم های غیربیماری زا و بیماری زا است، لذا می تواند محل مناسبی برای ورود و انتشار گونه های مختلف آمیب آکانتامبا و پاتوژن  لوفوموناس به دستگاه تنفسی باشد که در صورت ابتلا، هرکدام می توانند تظاهرات بالینی شبیه بیماری سل ایجاد نمایند. بنابراین در مطالعه حاضر میزان فراوانی این دو انگل در نمونه بالینی خلط بیماران مشکوک به سل مراجعه کننده به آزمایشگاه سل شهرستان بابلسر در استان مازندران به منظور رد دو عفونت مذکور مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش ها: این مطالعه ازنوع توصیفی- مقطعی بوده که بر روی 201 نمونه خلط افراد مشکوک به سل که به آزمایشگاه سل مرکز بهداشت شهرستان بابلسر استان مازندران در سال 1402 ارجاع شده بودند، انجام گردید و تمام اطلاعات دموگرافیک و اپیدمیولوژیک بیماران توسط پرسشنامه ثبت شد. در روش مورفولوژی از رنگ آمیزی گیمسا برای انگل لوفوموناس و ذیل نلسون برای انگل اکانتامبا استفاده گردید. هم چنین، برای شناسایی وجود انگل آکانتامبا، نمونه های خلط در محیط کشت آگار غیر مغذی (Non-nutrient agar) 5/1درصد، به مدت 72 تا96 ساعت کشت داده شد. برای این منظور، حدودا 50 میکرولیتر از خلط بیماران به محیط NNA اضافه شده و به میزان 20 میکرولیتر از محیط کشت تریپتیکاز- عصاره مخمر و مالتوز (TYM) و 20 میکرولیتر مخلوط باکتری اشرشیاکولی اتوکلاو شده به منظور غنی سازی محیط کشت استفاده شد. تمام پلیت های کشت شده در دمای 26درجه سانتی گراد انکوبه شدند و هر روز توسط میکروسکوپ نوری از نظر رشد تروفوزوئیت بررسی شدند. جهت تایید دقیق وجود انگل ها، استخراج DNA بر روی نمونه های خلط بیماران با روش فنل، کلروفرم و ایزوآمیل الکل صورت گرفت، سپس بر روی آن ها PCR معمولی با استفاده پرایمرهای اختصاصی انجام شد. یافته ها: در این مطالعه201 فرد مشکوک به سل وارد مطالعه شدند که از این میان 80 نفر (39/8 درصد) در منطقه شهری و 121 نفر(60/2درصد) در مناطق روستایی ساکن بودند. کم ترین سن فرد مورد مطالعه 7 سال و بیش ترین سن 88 سال بود.113 نفر (56/2 درصد) از افراد مورد مطالعه مونث و88 نفر(43/8 درصد) مذکر بودندکه از این تعداد 12 نفر از اتباع افغان ساکن در شهرستان بودند. در مطالعه حاضر، در مجموع 23 نمونه (11/4درصد) با استفاده از روش PCR از نظر انگل لوفوموناس مثبت شدند که 7 نفر (30/4 درصد) در منطقه شهری (بابلسر) و 16نفر (69/5 درصد) در مناطق روستایی سکونت داشتند، اما در هیچ کدام از نمونه ها انگل آکانتامبا با روش های رنگ آمیزی و مولکولی شناسایی نشد. استنتاج: مطالعه حاضر نشان داد به دلیل مشابهت تظاهرات بالینی سل و لوفومونیازیس، احتمال اشتباه شدن این دو بیماری از نظر بالینی وجود دارد. لذا توصیه می شود نمونه خلط تازه افراد مشکوک به سل به ویژه در مناطق آندمیک، از لحاظ بیماری لوفومونیازیس ریوی نیز بررسی شود.

هدف: آمیب های آزادزی از جمله آکانتامبا گروه بزرگی را تشکیل می دهند که در آب های شیرین، شور و تلخ، خاک مرطوب، گیاهان پوسیده و برخی بر روی مدفوع زندگی می کنند و از لحاظ پزشکی حایز اهمیت دارند. مطالعه حاضر با هدف بررسی تاثیر عصاره الکلی و آبی گیاه گندواش بر روی تروفوزوئیت ها و کیست های آکانتاموبا در شرایط برون تنی انجام شد.مواد و روش ها: در این پژوهش تجربی، پس از تعیین ژنوتایپ انگل جداشده از بیمار، از گیاه آرتمیزیا آنووا عصاره های آبی و الکلی تهیه کرده و غلظت های مختلف (1.25، 2.5، 5 و 10 میلی گرم بر میلی لیتر) از عصاره ها و آرتیمزینین در سه زمان مختلف (24، 48 و 72 ساعت) روی تروفوزوئیت ها و کیست های آکانتاموبا در شرایط برون تنی آزمایش شد. زنده بودن انگل ها با روش های تریپان بلو، MTT و فلوسایتومتری ارزیابی شد. یافته ها: مطالعه حاضر نشان داد که غلظت های مختلف عصاره آرتمیزیا آنووا فعالیت ضد آکانتاموبایی دارند. در حضور 10 میلی گرم بر میلی لیتر عصاره الکلی در محیط کشت پس از 72 ساعت، 30.51 درصد تروفوزوئیت ها و 91.40 درصد ازکیست ها زنده بودند. و همچنین در حضور 10 میلی گرم بر میلی لیتر عصاره آبی گندواش در محیط کشت، پس از 72 ساعت 58.25 درصد و 81.53 درصد به ترتیب از تروفوزوئیت ها وکیست ها زنده بودند.نتیجه گیری: عصاره های آبی و الکلی گیاه گندواش یک فعالیت ضدآمیبی وابسته به دوز و زمان را بر آکانتاموبا دارد.

در عملیاتی که روی آب و خاک در منطقه کازرون طی دو سال از 1378 الی 1380 به عمل آمد، مجموعا 354 نمونه آب و خاک از رودخانه ها و دریاچه پریشان تهیه گردید که 10 مورد آمیپ آکانتاموبا و 3 مورد نگلریا جداسازی شد این موارد مثبت براساس نمونه گیریهای متعدد که در فصول مختلف سال و در شرایط اکولوژیک متفاوت به عمل آمد، حاصل گردید. نمونه های آبی با روشهای فیلتراسیون و عبور از صافیها برای جداسازی میکروارگانیسمها و با کمک سانتریفوژ آماده شد و سدیمانهای حاصله با مشاهده در زیر میکروسکوپ با بزرگ نمایی 10 و 40 و کشت در محیطهای آگار غیر مغذی که توسط اشرشیاکلی تقویت می گردید مورد بررسی قرار گرفتند. ضمن این بررسی یک مورد کراتیت آمیبی ناشی از آکانتاموبا در بین بیماران چشمی نیز جدا و مورد شناسایی قرار گرفت، بیمار دختری 22 ساله و ساکن شهرستان کازرون می باشد که جهت درمان به پزشک معالج معرفی شد.